香菇菌种制备培养基的操作程序

1、选用优质土豆，去皮或挖出芽眼，剥去青皮，切成薄片，重200克，放入钢锅中，加水1000毫升，煮沸后保持小火加热30分钟，趁热使用经8层纱布过滤后，放入刻度为1000毫升的量杯（或量筒）中，加水至1000毫升，倒回不锈钢锅中，加入琼脂继续加热，待琼脂融化后加入葡萄糖，再加水至1000ml。 mL，用玻璃棒搅匀，趁热分装到试管中，或装入锥形瓶中备用。 2. 分装试管，将配制好的PDA培养基趁热（60）倒入准备好的量杯或玻璃漏斗中，分装试管。每个试管中的培养基为试管长度的1/4。培养基不应粘附在管口内壁上。如果有任何附着物，必须将其擦拭干净。 3、制作卫生棉条，取适量棉花做成较紧的卫生棉条，塞入试管约2厘米，外留1厘米，紧贴试管内壁。松紧度应用手指提起，不要取下。光亮圆润无皱折（如图3-1所示），然后将试管放入铁丝筐内。 4、灭菌，将装有培养基的试管放入灭菌器的铁丝筐内，盖上牛皮纸或聚丙烯塑料薄膜，包好，防止卫生棉条受潮。加热杀菌时，将锅内冷气排尽，待温度升至121时，保温30分钟后停止加热。当指针归零时，先打开锅盖的1/10口，等到没有直接蒸汽时，再打开所有锅盖，取出试管。 5、将试管放在斜坡上，将取出的试管冷却至50-60，然后用木架或木条按一定角度放在斜坡上。小试管斜面长2厘米，大试管（18200）斜面长约6厘米。完全凝固后，收起来备用。 6、灭菌效果检查：随机取3管斜面，置于28空白培养57天，检查斜面上是否有细菌和霉菌菌落。如果发现有细菌，说明灭菌不彻底，需要重新灭菌。